Evaluación de la expresión del gen Frizzled 7 durante el desarrollo y en la regeneración de la médula espinal de alevines de pez cebra (Danio rerio) mediante PCR

Abstract

El receptor Fzd7, se encuentra ampliamente caracterizado y presenta expresión en el sistema nervioso central del pez cebra, por lo que podría estar relacionado con la inducción de neuronas y la reconexión axonal, sin embargo, su expresión durante el proceso de regeneración de la médula espinal no ha sido estudiada. Este trabajo evaluó la expresión de fzd7 durante el desarrollo embrionario y en la regeneración de la médula espinal de alevines de pez cebra de 24 hpf, para ello, se diseñaron oligonucleótidos del gen fzd7a, se optimizaron las condiciones de la técnica de PCR para los homólogos de fzd7 y β-actina, se realizó la lesión de médula espinal en embriones de 24 hpf y se analizó la expresión de fzd7b mediante RT-PCR. Por RT-PCR se observó que el transcrito de fzd7 es de herencia materna y está presente hasta las 48 horas de desarrollo. Por otra parte, la lesión en músculo mostró no alterar la expresión de fzd7b a las 0 hpl, mientras que al lesionar la médula los resultados sugieren una ligera reducción en su expresión de las 0 a las 48 hpl. Los embriones lesionados en músculo se recuperaron de la lesión al 4 dpl, en aquellos lesionados en médula se observó actividad natatoria provocada por contacto a las 48 hpl y se identificó la generación de puentes axonales a partir de los 4 dpl y un 90% de regeneración a los 8 dpl. Palabras clave: Regeneración de médula espinal, Frizzled, fzd7, Pez Cebra, desarrollo embrionario, RT-PCR.