PREPARACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE LIPOPROTEÍNAS DE ALTA DENSIDAD COMO TRANSPORTADORES DE RODAMINA PARA TERAPIA FOTODINÁMICA

Abstract

Las lipoproteínas de alta densidad (HDL), participan en el transporte en reversa del colesterol, mecanismo mediante el cual suministran a las células del colesterol necesario para desempeñar sus funciones vitales. Las células de cáncer tienen una alta demanda de colesterol y otros nutrientes, por lo que sobreexpresan el receptor SR-B1, encargado de internalizar el colesterol contenido en HDL a la célula. Valiéndose de este principio, se espera una alta afinidad de las células de cáncer por las lipoproteínas de alta densidad reconstituidas (rHDL) por lo que serían un buen vehículo para el transporte de fármacos. La terapia fotodinámica (PDT) es un tratamiento emergente contra el cáncer que promete múltiples beneficios. Se basa en la administración de un fotosensibilizador (PS), una sustancia que, al ser irradiada a la longitud de onda adecuada, provoca daño a biomoléculas y muerte celular. La presente investigación se centra en el desarrollo de un vehículo de administración de rHDL para las rodaminas 123, 6G y B; sustancias con potencial actividad fotosensibilizadora. La capacidad fotosensibilizadora de las rodaminas fue demostrada al irradiar una solución de ácido fólico + rodaminas que resultó en la disminución de la concentración del ácido fólico. Se determinó el coeficiente de partición octanol/agua de las rodaminas antes mencionadas, con el fin de predecir si podrían internalizarse en las nanopartículas de rHDL. Se prepararon nanopartículas de rHDL vacías a las que se les determinó su espectro de absorción e infrarrojo, así como el tamaño de partícula mediante espectrometría UV-Vis, espectrometría IR y DLS respectivamente. Posteriormente, fueron preparadas NPs de rHDL cargadas con las rodaminas 123, 6G y B de las que se obtuvieron los espectros de absorbancia UV-vis con la finalidad de encontrar las bandas de las rodaminas, que demostraran que se encuentran dentro de las NPs. Se realizó un ensayo in vitro en el que células de cáncer de la línea celular T-47D fueron administradas con rodaminas: Rod 123, Rod 6G y Rod B y alternativamente otras células fueron administradas con rHDL + rodaminas: rHDL-rod123, rHDL-rod6G y rHDL-rodB, encontrándose cualitativamente mediante microscopía de fluorescencia que las células que fueron administradas con rHDL-rodaminas cargaron una mayor cantidad del PS.