Evaluación de la actividad de fagocitosis in vitro de PMN e inducción de apoptosis por Staphilococcus aureus capsular 5 y su relación con el gen hsp70 y la actividad de NADPH oxidasa

Abstract

El Staphylococcus aureus tipo capsular incrementa la mastitis en los bovinos lecheros, afectando la actividad de los neutrófilos (PMN) y como consecuencias la activación de la apoptosis celular. Se ha observado que las células expuestas a la acción de diferentes agentes estresantes, sobre expresan la proteína Hsp70, codificada por el gen HSP70 que interviene en el proceso de inducción de apoptosis. En el presente estudio, se identificó el polimorfismo del gen Hsp70-1 en 100 bovinos lecheros de dos regiones geográficas de México (región 1 Toluca, México y región 2 Medellín, Veracruz), por la técnica de Polimorfismo de Longitud de Fragmentos de Restricción PCR-RFLP y Polimorfismo de conformación de cadena individual de ADN (SSCP). También se evaluó la sobrevivencia intracelular de Staphylococcus aureus en los neutrófilos bovinos y su capacidad para induccir apoptosis in vitro, para lo cual se emplearon dos tratamientos, neutrófilos expuestos a S. aureus capsular 5 (SC5) y como control a neutrófilos expuestos a S. aureus tipo compacto (SC). Finalmente se evaluó la actividad NAPDH oxidasa a partir de la formación de peróxido de hidrógeno por el método de reducción de nitroazul de tetrazolio (NTB). Los resultados muestran que el monomorfismo del gen HSP70 se encuentra ampliamente distribuido en las poblaciones de Bos taurus y Bos indicus presentes en las zonas templadas y tropicales de México. Tanto la actividad de fagocitosis como la inducción de apoptosis in vitro de los PMN expuestos a S. ureus no fue influenciada por la región climática o condición clínica de los bovinos donadores, pero si por la presencia de capsula del S. aureus.