CARACTERIZACIÓN DE LOS ANTICUERPOS POLICLONALES OBTENIDOS UTILIZANDO COMO INMUNÓGENO LAS FRACCIONES TÓXICAS DE Centruroides UNIDAS A CARBOXIMETIL-CELULOSA

Abstract

La intoxicación por picadura de alacrán en seres humanos se debe principalmente a péptidos con actividad neurotóxica presentes en cantidades <5% dentro del veneno, actuando sobre los canales de Na+ dependientes de voltaje expresados en células excitables. En México, el tratamiento específico disponible es un antiveneno obtenido de caballos hiperinmunizados con una mezcla de venenos de alacranes del género Centruroides (C. limpidus, C. noxius, C. tecomanus y C. suffusus). En el presente trabajo, se obtuvieron las fracciones tóxicas a mamíferos de la mezcla de venenos mediante su interacción con CM-32, dentro de éstas se identificaron las toxinas Cn2 y Cll1m, principales componentes tóxicos de los venenos de C. noxius y C. limpidus, respectivamente. Mientras que dentro de los componentes que no fueron afines a la resina ni tóxicos en ratones, se identificó la toxina Ct16, del alacrán C. tecomanus. La letalidad generada por la fracción tóxica fue aproximadamente 3.2 veces más potente que la del veneno completo. Se produjeron anticuerpos policlonales en conejos y caballos utilizando como inmunógeno la fracción tóxica enriquecida con la resina CM-32. Las características de reconocimiento y neutralización de los sueros hiperinmunes obtenidos fueron comparadas con las de sueros de conejos y caballos hiperinmunizados con la mezcla de venenos de Centruroides. Las evaluaciones in vitro de todos los sueros hiperinmunes revelaron que hubo reconocimiento hacia los componentes de la mezcla de venenos de Centruroides, y en los análisis in vivo mostraron su capacidad al neutralizar los síntomas de intoxicación y la letalidad generada por la mezcla de venenos en ratones. No obstante, la DE50 conferida por los anticuerpos producidos en los animales inmunizados con la fracción tóxica enriquecida con CM-32 fue menor que la obtenida al inmunizar con la mezcla de venenos. El uso de carboximetil celulosa para separar y aislar toxinas de alacranes ha demostrado ser eficiente, sin embargo, al ser utilizada como parte del inmunógeno (con las fracciones tóxicas acopladas), los resultados obtenidos fueron inferiores a los que se obtienen utilizando la mezcla de venenos de Centruroides.