IDENTIFICACIÓN DEL VIRUS DE LA NECROSIS PANCREÁTICA INFECCIOSA POR MEDIO DE PCR ANIDADA

Abstract

El procedimiento diagnóstico para la identificación del virus de la necrosis pancreática infecciosa (VNPI) a partir de peces sin signos clínicos, con base en el Manual de Pruebas de Diagnóstico para los Animales Acuáticos, editado por la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE) son: el aislamiento viral en cultivo celular, seguido de inmunoensayos (inmunofluorescencia indirecta, seroneutralización y ensayo por inmunoadsorción ligado a enzimas). Sin embargo, el protocolo indicado por la OIE para dar una muestra negativa por medio de cultivo celular requiere de al menos 21 días, lo que resulta costoso y demorado. Para reducir tiempo en el diagnóstico, se estandarizó una PCR anidada (PCRa) utilizando dos pares de oligonucleótidos iniciales: INFE1+ e INFE1- en muestras de peces infectados. A partir de la prueba diagnóstica estandarizada, el valor de las características intrínsecas para sensibilidad fue de 66% al incluir los días 2, 4 y 6 posterior a la infección, mientras que la sensibilidad a partir del día 4 posterior a la infección fue de 100%. La especificidad obtenida fue del 100%. Con base en los resultados, la técnica de PCRa puede implementarse para la detección del VNPI, en menor tiempo que las técnicas recomendadas por la OIE, a partir de los serotipos antigénicos ampliamente diseminados en el mundo (A1 y A2).