RELACIÓN DE LA CALIDAD ESPERMÁTICA Y DE PARP DIVIDIDO CON LA EXPRESIÓN DE CASPASAS 3 Y 7 ACTIVAS EN ESPERMATOZOIDES DE CERDO

Abstract

Los ensayos de laboratorio evalúan la calidad general del semen; sin embargo los espermatozoides presentan diferentes atributos que les permiten realizar su función como son: la integridad de la membrana, la actividad metabólica y la estructura de la cromatina. La evaluación de esas propiedades en conjunto con la detección de marcadores apoptóticos, como las caspasas 3 y 7 activas, podría ser integrada en los análisis de semen, y ser evaluadas de manera simultánea para optimizar la selección de los espermatozoides utilizados en las técnicas de reproducción asistida. Las caspasas son proteasas que desencadenan la apoptosis por medio de una cascada de señalización en la cual son divididoslos substratos celulares como la polimerasa poli-ADP-ribosa-(PARP) que es una enzima involucrada en la reparación del ADN. Se ha detectado la presencia de caspasas 3y 7 activas en espermatozoides de cerdo frescos y seleccionados; sin embargo, su función no ha sido determinada. El objetivo del presente estudio fue investigar si las caspasas 3 y 7 activas se relacionan con indicadores de la calidad espermática y si presentan actividad proteolítica en los espermatozoides eyaculados de cerdo. Se utilizaron espermatozoides de cerdo para evaluar la movilidad progresiva, la integridad de la membrana, la actividad metabólica, la integridad del ADN y la expresión de las caspasas 3 y 7 activas antes y después de la técnica de swim up(SU); además, se identificó la presencia y localización de PARP dividido en conjunto con la expresión de caspasas 3 y 7 activas utilizando un modelo de inducción química para sobreexpresar la activación de caspasas en muestras no seleccionadas; estos ensayos se realizaron mediante citometría de flujo y microscopía de fluorescencia.El SU logro mejorar la calidad espermática al incrementar el porcentaje de espermatozoides móviles y metabólicamente activos. Sin embargo., también se pudo observar un incremento de espermatozoides con caspasasactivas y alteraciones en la cromatina. Los espermatozoides de cerdo presentaron a PARP dividido en la región acrosomal. Es posible escindir a PARP mediante inductores de apoptosis, aunque no es clara su relación con la expresión de las caspasas 3 y 7 activas.Las substancias químicas utilizadas como inductores de caspasas3 y 7 activas no produjeron diferencias significativas.Con el modelo de inducción química de caspasas activas se obtuvo un cambio en los descriptores de movilidad espermática, pero no se encontró una relación entre el porcentaje de caspasas activas y los descriptores de movilidad. Se desconoce hasta el momento la función de las caspasas 3 y 7 activas en los espermatozoides, por lo tanto es necesario continuar estudiando para entender si ejercen una función proteolítica, para poder determinar si la presencia de estos marcadores apoptóticos afectan la calidad de los eyaculados que son utilizados en las técnicas de reproducción asistida en las diferentes especies.