Establecimiento de cultivo in vitro de Tamarindus indica L. para la obtención de antioxidantes.

Abstract

El tamarindo (Tamarindus indica L.) es una especie vegetal utilizada tradicionalmente en México como materia prima en el procesamiento de dulces y bebidas; diversos estudios fitoquímicos han evidenciado que es una buena fuente de antioxidantes, los cuales se pueden encontrar en el fruto, semillas y hojas. El presente trabajo tuvo como objetivo el desarrollo de diversos experimentos encaminados a establecer cultivos in vitro de Tamarindus indica L. productores de metabolitos secundarios como son los compuestos fenólicos (antioxidantes). Para lo cual se establecieron cultivos asépticos a partir de semillas, las cuales se colocaron en medio MS, suplementado con carbón activado, ácido cítrico, ácido ascórbico y PVP, además de diferentes concentraciones de reguladores de crecimiento vegetal (BAP, 2,4-D, Cinetina y Thidiazuron). Se evaluó el porcentaje de germinación en donde se observó que el mayor porcentaje se obtuvo en el medio de cultivo carente de reguladores del crecimiento, mientras que los porcentajes registrados por los cultivos suplementados con los diferentes reguladores del crecimiento ensayados, variaron entre un 40 a un 80%. Una vez germinadas las semillas y desarrolladas las respectivas plántulas, se tomaron hipocótilos, cotiledones y hojas como fuentes de explantes, los cuales se sembraron en medio de cultivo MS suplementado con los mismos componentes utilizados en la germinación. Los cultivos se incubaron durante 30 días, al término de los cuales se registró el porcentaje de explantes con formación de callo, así como la cantidad de callo formado. Los resultados obtenidos indican que los tratamientos suplementados con 2,4-D 1.5 mg/L, BAP/2,4-D en concentración 1:1 mg/L y Thidiazuron en concentración 0.5 mg/L, estimularon la mayor formación de callo. A partir de los cultivos de callo generados se establecieron cultivos de células en suspensión, lo cual se realizó colocando 4g de callo en un matraz Erlenmeyer de 250 mL conteniendo 100 mL de medio de cultivo MS líquido, suplementado con de 0.5mg/L de thidiazuron. Los cultivos se colocaron en un agitador orbital a 110 rpm. Durante 28 días se llevó el seguimiento de una cinética de crecimiento a través de las variables peso fresco y seco, la cual nos arrojó que la velocidad de crecimiento del cultivo es de 0.187 g/día con una taza de duplicación de 3.7 días. Las células en suspensión, resultado de la cinética fueron cosechadas, liofilizadas y sometidas a una extracción metanólica, asistida por ultrasonido. A los extractos obtenidos se les determino el contenido de fenoles totales por el Método de Folin- Ciocalteu dando una concentración máxima de 14.35 mg/L de medio, con un porcentaje de inhibición del radical DPPH del 46.70%.