El presente estudio tuvo como finalidad el desarrollar la técnica de inoculación in vitro de la roya blanca, con el objeto de ahorrar tiempo y espacio en la caracterización de los distintos cultivares de crisantemo respecto al grado de susceptibilidad o resistencia a este patógeno. En Tenancingo, Estado de México, en el periodo 2004-2005 se colectaron hojas de crisantemo que presentaban daños por la enfermedad, se desinfectaron para posteriormente inocular las pústulas sobre plantas creciendo bajo condiciones in vitro. El recipiente de cultivo se mantuvo a una humedad relativa alrededor del 95% y temperaturas entre los 13 y 27 ºC, bajo condiciones de luz y oscuridad. Los daños por la enfermedad se manifestaron a los 20 días después de la inoculación. Los tratamientos a 17 ºC y oscuridad generaron un mayor número de pústulas (18,7). El diámetro de las pústulas fluctuó entre los 0,71 mm (tratamientos con 17 ºC y luz) a los 1,79 mm en los tratamientos con 19 ºC y bajo oscuridad.